驯鹿生物双靶点CD5/CD7 CAR-T研究结果荣登国际期刊STTT

2022年3月25日，驯鹿生物与华中科技大学同济医学院附属同济医院联合在国际高水平期刊Signal Transduction and Targeted Therapy（IF=18）在线发表了题为“T cells expressing CD5/CD7 bispecific chimeric antigen receptors with fully human heavy-chain-only domains mitigate tumor antigen escape”的研究论文，系统介绍了CD5/CD7双靶向CAR-T的临床前开发数据。戴振宇博士、穆伟博士为共同一作，华中科技大学附属同济医院血液科主任周剑峰教授，驯鹿生物研发VP谭涛超博士为共同通讯作者。

CAR-T 疗法在晚期B细胞恶性肿瘤和多发骨髓瘤领域取得了巨大成功，但难治复发的T细胞相关肿瘤其治疗选择相当有限，疗效也不佳。在此之前，驯鹿生物开发了靶向CD5的单靶点CAR（研究文献：https://doi.org/10.1016/j.ymthe.2021.07.001），并已进入IIT临床试验阶段。为了进一步提高疗效，扩大患者范围，防止抗原逃逸的发生，我们进一步开发了CD5/CD7双靶向的CAR-T。

为了开发出对T细胞恶性肿瘤有更好疗效的双靶向策略，我们充分调研了各种T细胞肿瘤的mark，并从中选择了T细胞泛标记抗原CD5和CD7。CD5在正常T细胞和约85%的T细胞恶性肿瘤以及一些B细胞恶性肿瘤中经常表达，它充当T细胞受体(TCR)和B细胞受体(BCR)的抑制性受体。CD7是一种跨膜蛋白，在超过90%的淋巴细胞系T细胞白血病和淋巴瘤以及约30%的急性髓性白血病中表达，但它似乎对T细胞的发育或功能的贡献有限。CD5和CD7在不同的PTCL上表达谱有很好的互补性，开发双靶向CAR-T不仅可以防止抗原逃逸，还可以覆盖更多的PTCL病人，具有高度创新性和实用性。

为了解决靶向T细胞泛标记的CAR-T细胞自相残杀的问题，在双特异性CAR的慢病毒转导之前进行了基于CRISPR/Cas9的CD5和CD7基因敲除。在结构方面，比较了串联和并联结构双靶向CAR结构的体外和体内活性，以确定适合在临床环境中解决T细胞恶性肿瘤抗原逃逸的最佳候选分子。研究结果表明，敲除CD5和CD7可防止CD5/CD7双特异性CAR-T细胞自相残杀，并且串联双靶向CAR 在杀伤活性和防止肿瘤逃逸方面比并联双靶向CAR更有效。上述研究结果为T细胞肿瘤治疗提供了有效的新思路和新策略。

为了更好地面向双靶向CAR-T和双抗开发需求，驯鹿生物开发了独特的全人源单域抗体平台。全人源单域抗体只包含人源的单重链，结构与羊驼纳米抗体类似，因为没有轻重链错配问题，非常有利于多靶向产品的开发。在这个项目里，我们首先从IMARS抗体库中筛选到高质量的分别靶向CD5和CD7的人源单域抗体，人源单域抗体的应用大大降低了双靶向CAR-T结构开发的难度，并且相比羊驼纳米抗体具有更低的免疫原性风险，为双靶向产品开发打下良好基础。通过系统的体外和体内实验，比较了不同克隆和结构双靶点CAR多方面的指标，获得了杀伤功能好、扩增能力强、耗竭指标低的候选分子。该产品的成功开发，代表驯鹿生物在实现“为患者带来治愈的希望”这一愿景上，又迈出了坚实的一步。